|
Introduction : Bactéries et moisissures sont des êtres hétérotrophes proliférant sur les milieux riches en matière organique (pain, confitures, ...). On sait depuis très longtemps que le miel, bien que très sucré, ne moisit pas. De plus, il a même été traditionnellement utilisé comme désinfectant (en pommades). L'analyse chimique du miel montre qu'il n'est pas constitué que de sucre, mais qu'il contient également une substance, la D-glucose oxydase (GOD), ainsi qu'un désinfectant actif contre les bactéries, l'eau oxygénée H2O2. H2O2 est le produit de la réaction: Glucose + O2 + H2O &emdash;&emdash;&emdash;> Acide gluconique + H2O2 Problèmes : 1) Quel est le rôle de la D-glucose oxydase ? 2) Quelle est la nature de la D-glucose oxydase ? ื Formuler les hypothèses. Expérience : 1) En réponse à la question : quel est le rôle de la GOD ? On mesure la quantité d'O2 dans un réacteur grâce à une sonde à oxygène reliée à un ordinateur. ื Expliquer rapidement en quoi cette manipulation permet de vérifier la première hypothèse. Sur le réacteur : Verser 5 ml de substrat (glucose 0,1 M) dans le réacteur. Mettre en place le piston pour régler le volume de la cuve à 5ml, éliminer les éventuelles bulles d'air, lancer l'agitation. (sauf nouveaux réacteurs) Sur l'ordinateur, dans le logiciel enzymo : Sélectionner le menu OXYMETRIE ET CINETIQUE Sous menu INITIALISATION : Glucose oxydase Choix de l'unité : µmol/l Sous menu MESURES : Option OXYMETRIE Durée totale 5 min Volume de la prise d'essai 5 ml Concentration minimale 0 µmol/l Concentration maximale 400 µmol/l Lancer les mesures en appuyant sur une touche. à t= 1 minute, injecter 0,1 ml de solution de GOD. Les échelles du graphique peuvent être modifiées par les commandes ORIGINE et GRAPHIQUE. On imprimera le graphique à la fin. ื Décrire, puis interpréter le graphique obtenu: conclure sur le rôle de la GOD. 2) En réponse à la question : quelle est la nature de la GOD ? Après avoir vidé et rincé le réacteur (utiliser la grosse seringue), refaire la même expérience que ci dessus, sans injecter la solution de GOD, mais en ajoutant : à t= 1 minute 0,1 ml de solution de GOD bouillie. à t= 2 minutes 0,3 ml du milieu issu de la première expérience, que l'on aura gardé de coté. ื Décrire, puis tenter une explication des résultats. Au bureau, le professeur a fait une expérience: il a fait le test du biuret, qui caractérise les peptides et les protéines, sur 3 échantillons: Eau distillée. Solution d'albumine (l'albumine est une protéine). Solution de GOD. ื Schématiser, décrire les résultats, puis interpréter et conclure en répondant à la question. |